电基因疗法

 

        通过人体遗传物质进行修正、补充或改造以达到治疗疾病的目的，也称作“以基因为靶点的治疗”。

        是应用电穿孔技术，通过细胞膜的电渗作用在体内进行高效基因转移的方法。

 

 

        1、 理化方法介导的靶向基因转移：包括裸露DNA直接注射、羟基磷灰石共转化、多价阳离子-DNA复合物转化、电转化、脂质体共转化和受体介导的转化等。

        2、 病毒载体介导的靶向基因转移：主要有逆转录病毒载体和腺病毒载体。 

        电基因疗法的作用机制：细胞在短的高压脉冲作用下，细胞膜出现大的孔隙，进行电转移的目的基因一般为150kb（千碱基对，则其直径约为2000nm）以下，但柔韧性很强，可以在电场作用下发生变形和运动，因此，即使孔隙直径小于目的基因直径，目的基因也能穿入细胞。随后在相对弱的电脉冲作用下，可以使孔隙持续扩张状态，当电脉冲去除时，由于目的基因的穿过可以防止孔隙封闭，使之维持较长时间，使目的基因自由穿过细胞膜。同时目的基因在电场力的作用下，也可以在细胞两个孔隙中间切断细胞膜，直接使大的基因片段转移入细胞。细胞膜发生电穿孔后，细胞内依旧具有完整的细胞骨架系统，因而细胞依旧保持活性，可以使转移进入的目的基因有效表达。此外，在进行电穿孔时，高压脉冲可以使细胞膜形成反折叠，直接吞噬质粒携带的目的基因；目的基因本身也可能通过自由扩散，穿过细胞膜，但这种作用很微弱。